重点分析：实验试剂应用的常见问题
2024-06-26
来源：小奈知识网
重点分析：实验试剂应用的常见问题
1. 测定范围
每种待测物都有一个可测定的浓度或活性范围，样品结果若超过此范围，分析仪将显示结果超过范围的提示。表示试剂已经变质，应更换合格试剂。
2. 底物耗尽
使用连续监测法、两点法测定酶活性时，若酶活性非常高，底物接近被耗尽，吸光度上升或下降会超过某一吸光度变化范围，监测期的吸光度将偏离线性，使测定结果不可靠。
3. 试剂空白
每种试剂都有一定的空白吸光度范围，试剂空白吸光度的改变往往提示该试剂的变质。而试剂空白吸光度限值，常作为程序参数输入仪器，如经核查超限，仪器会自动报警，提示更换试剂。需要指出的是，还原型辅酶I (或II)等投料量不足或劣质的原料，往往需要加大用量，才使“表观”吸光度上升，凑合过试剂空白核对的“关”，其后果为如下情况：
① 线性范围变窄现象：高值测不高。可能因为：a.生产试剂时有效成分投料量不足；b.试剂成份稳定性较差。
② 灵敏度变低现象：酶促反应速度曲线斜率下降，测定结果有严重系统误差。可能因为试剂底物浓度不足。
③ 低值偏高现象：试剂空白的变化曲线(吸光度VS时间)明显波动。可能因为试剂自身不稳定，自行分解；工具酶纯度不够，杂酶含量超限，导致干扰作用。
4. 样品信息
样品的溶血、脂血、黄疸等会对测定结果产生非化学反应的干扰。因此，应根据溶血、脂浊、黄疸的光谱吸收特性，采用双波长或多波长的检测模式，并在结果计算中扣除因溶血、脂血、黄疸引起的影响，减少干扰程度。
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