江苏 液相色谱仪 高效液相色谱法测定饲料中的喹乙醇

一、简介

饲料是动物的粮食，也是人类的间接食品。其质量安全与否，不仅关系到饲养动物的健康生长，更重要的是动物产品质量和与人类健康的密切关系，也就是说，没有安全的饲料就没有安全的畜产品。

喹乙醇是动物饲料添加剂，学名为2－[N－2－羟基－乙基]－氨基甲酰－3－甲基－喹恶啉－1，4－二氧化物。它既是广谱抗菌药又是禽畜生长促进剂。1000kg饲料中喹乙醇添加量一般为15-100g。添加量偏高对禽畜不安全，鸡鸭尤为敏感。紫外分光光度法本底干扰大。有关饲料中喹乙醇的HPLC国内未见报道，国外报道甚少。南京科捷分析应用研究所建立了测定饲料中喹乙醇的HPLC方法，灵敏度和回收率高，操作简便可靠，对预混料浓缩料及全价料等饲料品种适应性强。

二、LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪配置

LC-10Tvp高压恒流泵：2台 SPD-10Tvp紫外检测器：1台 SCL-10Tvp 系统控制器：1台 7725i手动进样阀： 1套

色谱工作站：1套 （VI2010、N2000、N3000选用） 液相色谱柱：1支 （C18 4.6*250mn,5um） 微量进样器：1支 （50ul/100ul） 进样支架 ：1只 （进样阀用）

三、LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪特点

LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪是南京科捷分析仪器有限公司为了快速地满足多样化的客户需求，在原有的STI501液相色谱仪的基础上经过优化，利用美国先进技术开发设计，国内加工生产的的一款新型的液相色谱仪。LC-10Tvp等度高效液相色谱仪实现了人机对话，可实时对仪器的运行状态进行监控，并可对潜在和已出现的故障做出判断，同时提供在线解决方案。该仪器也全面实现了远程的准无人操作，大大提高了仪器的使用效率，同时通过高精度的AS1000自动进样系统，实现自动化进样，最大程度抑制了样品的交叉污染，提供样品分析精度。LC-10Tvp等度高效液相色谱仪可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。 主要特点

丰富的功能——符合客户对分析的不同需求

硬件具有VP功能，记录维护信息和操作记录，符合GLP/GMP要求；系统控制器增具有时钟、温度计、湿度计等人性化设计的功能。 卓越的性能——满足客户对仪器的严格要求

检测器采用进口氘灯、光电池以及1200条/mm凹面光栅组成的双光束单色器；精密加工的双透镜流通池，控制波长调节的高精度微处理器以及双路高速的采样频率，确保了低噪声、

低漂移及超高灵敏度等特点。 VI2010工作站符合多种法规要求。 可靠的结果——满足客户对结果的准确要求

与进口仪器做对比试验,分析结果具有高度的一致性。 简便的操作——便于客户对软件的熟练操作 软件采用多窗口模式，操作方便。 精美的外观——满足客户对仪器的视觉要求 外形精美，带来视觉上的享受。 技术指标

LC-10Tvp高压恒流输液泵

输液方式 最大输液压力 流量设定范围 流量设定值误差 流量稳定性误差 压力脉动 泵密封性 时间程序功能

尺寸 重量 使用环境温度范围

波长范围 波长示值误差 波长重复性误差 动态噪声 静态噪音 动态基线漂移 静态基线漂移 线性范围 最小检测浓度 定性重复性 定量重复性 光谱带宽 流通池体积 光程 时间程序功能

尺寸 重量 使用环境温度范围

-9

-5-5

微体积串联双柱塞 0～9999Psi

0.001～9.999ml/min （以0.001ml/min步长调节流量）

≤0.5% ≤0.2%RSD

小于15Psi （流量1mL/min，压力600～1600Psi 。） 压力为5400Psi，时间为10min，压降小于400Psi 。

有

W260×H130×D420mm

11kg 4～40℃ 190nm～700nm ≤±1nm ≤±0.1nm

≤ ±0.75×10AU （甲醇，1ml/min，254nm，20℃ 。） ≤ ±0.5×10AU （空池，响应时间1秒，20℃ 。） ≤±1×10AU/h （甲醇，1ml/min，254nm，20℃ 。）

≤0.5×10

-4

-4

SPD-10Tvp紫外可见可变波长检测器

（空池，响应时间1秒，20℃ 。）

≥10

4

≤1×10g/mL （萘/甲醇溶液）

RSD6≤ 0.1% RSD6≤ 0.5%

6nm 8μL 10mm 有

W260×H130×D420mm

11kg 4～40℃

四、饲料中喹乙醇的检测方法

1仪器与试剂

南京科捷LC-10Tvp液相色谱仪 SPD-10Tvp紫外检测器 超声波清洗器

甲醇为HPLC淋洗剂

喹乙醇标准对照品(99.6%中国兽药监察所) 乙酰苯胺和二甲替甲酰胺均为分析纯试剂 饲料样品南京农用饲料厂 2色谱条件

色谱柱为科捷C8色谱柱 流动相为甲醇：水(20：80)，流速0.8ml/min。 UV260nm 柱温为30℃ 在该条件下，喹乙醇及内标物保留时间分别为5.12min和11.54min喹乙醇标准对照品及饲料样品色谱图见图1 3标准曲线的制作

精确称取标准品及乙酰苯胺（内标），用DMF溶解配成500g/L，喹乙醇储备液(A)及300mg/L，乙酰苯胺储备液(B)，分别移取储备液0.1,0.3,0.5,1.0,2.0ml置于5只10ml棕色容量瓶中，每瓶预先加入0.3ml内标液（B）,用DMF稀释至刻度，过滤，分别进样5ul，以喹乙醇与内标的面积比Ψ与其相应的浓度比X作图,为一直线，喹乙醇线性回归方程为Ψ=-0.6303+3.5177X(r=0.9998) 4样品处理

取1kg饲料粉碎混匀后精确称取2.5g置于25ml棕色容量瓶中，加入

20mlDMF超声波处理10min，50水浴温热5min，离心4000r/min倾出清液，将清液转移到一个盛有0.8ml内标液的25ml棕色容量瓶中用DMF定容至25mL，过滤，进样5ul，测出喹乙醇及内标物峰面积后，按内标法定量测得批号960414-960425全价饲料中喹乙醇含量为35.78-102.45ug/g测得批号961426-961431，预混料中喹乙醇含量为2.250-3.146ug/g



五、结果

南京科捷开发的测定饲料中的喹乙醇的方法灵敏度、重现性和回收率较高，内标定量准确，操作简便易行，测试成本低，样品适应性强，有一定的推广价值。