党参多糖滴丸中党参多糖的含量测定

中国药物与Ｉ｝缶床２０１０年５月第ｌ０卷第５期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｒｅｍｅｄｉｅｓ　！　堕　ｆｄｙ　Ｑ　！　！：　：　：　・　５ｌ５　・　党参多糖滴丸中党参多糖的含量测定　杨静苏强刘恩荔　高建平　【摘要】　目的建立党参多糖滴丸中党参多糖的含量测定方法。方法采用紫外分光光度法，检测波长　本法简便快　为４９０　ａｍ。结果线性范围为５０—６００　Ｉｘｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９），平均回收率为１００．２６％，ＲＳＤ为１．６８％。结论捷，准确度高，重复性好，可作为党参多糖滴丸的质量控制方法。　【关键词】分光光度法；药用制剂；质量控制　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　Ｒａｄｉｘ　Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓ　Ｐｉｌｓ　ｙＡ　ＮＧ　ｉｒｎｇ，　ＳＵ　Ｑｉａｎｇ，ＬＩＵ　Ｅｎ—ｌｉ，　ＧＡ　０　Ｊｉａｎ－ｐｉｎｇ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ，Ｔａｉｙｙｕａｎ　０３Ｏｏｏ１　Ｃｈｉｎａ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　Ｒａｄｉｘ　Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓ　ｐｉｌ１．　Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＵＶ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｔ　ａ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　４９０　ｎｍ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ　ｗａｓ　５０－６００　Ｉｘｇ／ｍｌ　ｒｒ＝０．９９９）．１’ｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　１００．２６％．ＲＳＤ＝１．６８％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＵＶ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ　ｃａｎ　ｂｅ　ａ　ｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄ，ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｒａｄｉｘ　Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓ　Ｐｉｌｌｓ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】　Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｙ；Ｐｈａｒｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ；Ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　现代药理学研究证实党参多糖具有广泛的药理　试品溶液在４９０　ｎｍ波长处均有明显吸收，阴性对照　液在４９０　ｎｍ波长处未有吸收峰出现。故选择４９０　ｎｍ波长为测定波长。　作用，主要包括调节机体免疫、清除自由基、造血及　抗肿瘤等　］。党参多糖滴丸是党参多糖经加工制成　的滴丸剂，其主要成分为党参多糖。本文对党参多糖　２．１．３提取时间的考察：为保证党参多糖在回流提　取过程中能提取完全，分别进行了３、４、５　ｈ提取时　滴丸中党参多糖的含量进行了研究，以期建立党参　多糖滴丸的质量控制方法。　１仪器与试剂　间的考察，结果经４　ｈ提取含量较高。所以选用４　ｈ　提取。　１．１仪器：Ｔｕ—ｌ９０１紫外吸收光谱仪（北京普析通　用仪器有限责任公司），７５２型分光光度计（上海菁　华科技仪器有限公司），ＭＰ３００２分析天平（０．１　ｍｇ）。　１．２药品与试药：党参多糖滴丸（山西医科大学药　学院自制）；无水葡萄糖对照品（中国药品生物制品　检定所）；其他试剂均为分析纯。　２方法与结果　２．１．４加热时间的考察：在固定冷却时间的基础上，　对显色加热时间进行考察，结果表明显色加热时间　１５　ｍｉｎ，供试品吸收值最高，故将显色加热时间定为　１５　ｍｉｎ。　２．２试验方法与结果　２．２．１溶液的制备　对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的无　２．１试验条件的选择　２．１．１含量测定方法的选择：党参多糖滴丸主要含　水葡萄糖对照品适量。加水制成每１　ｍｌ含１　ｍｇ的　溶液，即得。　有多糖，由于多糖与苯酚一硫酸发生明显显色反应。　据此特点，选择无水葡萄糖作为对照品，采用比色法　进行了含量测定［　，引。　２．１．２检测波长的选择：分别取无水葡萄糖对照品　供试品溶液的制备：分别取３批滴丸数粒．研　细，精密称定（２．９２００、２．８９２０、２．８８２０　ｇ），分别置１００　ｍｌ容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，分别取　１０　ｍｌ，加乙醇１５０　ｍｌ置冰箱过夜。取出，离心，分别　弃去上清液，沉淀加水溶解并转移至１００　ｍｌ的容量　瓶中，加水至刻度，摇匀，即得［９］。　２．２．２方法学考察　溶液，党参多糖滴丸供试品溶液及以相同工艺制备　的阴性对照溶液（缺党参多糖）。经显色后在２００～　７００　ｎｍ范围内进行紫外扫描．结果对照品溶液和供　基金项目：太原市明星科技项目（０８１２１００９）　２．２．２．１线性关系考察：分别精密称取对照品溶液　０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６　ｍｌ，各加蒸馏水至１　作者单位：０３０００１太原，山西医科大学药学院生药学教研室　通信作者：高建平　中国药物与临床２０１０年５月第ｌＯ卷第５期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ．Ｍａｙ　２０１０．Ｖｏ１．１０．Ｎ０．５　ｍｌ，然后各加５％苯酚１．０　ｍｌ，摇匀迅速滴加浓硫酸　５　ｍｌ，摇匀，置沸水浴中加热１５　ｍｉｎ，然后冷却至室　温。以相应的试剂为空白．在４９０　ｎｍ波长处测定吸　２．２．２．３精密度试验：取供试品，按“２．２．１”项下方法　操作制备供试品溶液，连续测定５次．结果ＲＳＤ＝　０．６５％，表明仪器精密度良好。　２．２．２．４重复性试验：取供试品５份，分别按“２．２．１”　项下方法操作并测定每份的含量。结果平均含量为　每丸２．５３４　ｍｇ，ＲＳＤ＝０．８４％，表明方法重复性良好。　光度，以对照品浓度为横坐标，吸收值为纵坐标，绘　制标准曲线。结果浓度在５０～６００　ｍｌ范围内呈良　好的线性关系，回归方程为Ｙ＝１０．５４９Ｘ＋０．０３０６．Ｒ＝　０．９９９（Ｙ为吸光度值，　为对照品浓度）。　２．２．２．２稳定性试验：取供试品，按“２．２．１”项下方法　２．２．２．５回收率试验：采用加样回收法，取己知含量　的供试品６份，分别精密加入无水葡萄糖对照品适　量，按“２．２．１”项下方法操作并测定每份的含量，计算　回收率，结果见表１。　操作制备供试品溶液，分别于０、１０、２０、３０、４０　ｍｉｎ　测定，计算，ＲＳＤ＝１．８５％，表明多糖化合物显色后３Ｏ　ｍｉｎ内吸收值基本稳定不变。　表１加样回收率试验　２．２．２．６样品测定：分别量取供试品溶液０．２　ｍ１．置　ｌ０　ｍｌ具刻度试管中，按照对照品溶液制备方法，加　５％的苯酚溶液１　ｍｌ，再加５　ｍｌ的浓硫酸，摇匀，置　果可知，苯酚一硫酸法线形较好，回收率较高。综合考　虑２种方法的优缺点，本课题采用苯酚一硫酸法测定　党参多糖提取物中总糖的含量。　６０℃的水浴上加热１５　ｒｎｉｎ取出放冷，相应空白为在　４９０　ｎｍ处测定吸光度值．再从标准曲线上读出供试　品溶液中含无水葡萄糖的质量（ｍｇ），计算，即得。含　量测定结果见表２。　表２滴丸多糖含量测定（％）　本实验采用紫外分光光度法测定党参多糖滴丸　中总多糖含量，实验表明该方法线性良好。具有简　便、准确的优点，可以作为质量控制的方法。　参考文献　１　陈克克．党参多糖的研究进展．觋代生物医学进展，２００７，７（４）：　６３５—６３７．　２　张晓君．祝晨．胡黎，等．党参多糖对小鼠免疫和造血功能的影　响＿中药新药与临床药理，２００３，１４（３）：１４７—１４５．　３　许爱霞，张振明，葛斌，等．党参多糖抗衰老作用机制的实验研　究．中国现代应用药学杂志，２００６，２８（３）：７２９—７３０．　４　张天红，张馨。耿爱萍．潞党参药理实验研究．时珍国医国药，　２００１，１２（６）：４８８－４８９．　３讨　论　苯酚一硫酸法和葸酮一硫酸法是较为常用的２种　多糖含量测定方法，这２种方法各有优缺点。蒽酮一　硫酸法的缺点是蒽酮试剂不稳定，溶液需要临用前　配制．不适用于大量样品的测定，但是测定少量样品　优于苯酚一硫酸法；而苯酚一硫酸法的缺点是苯酚容　５　宫存杞．张君．赵娟，等．新疆党参多糖的制备及体内抗肿瘤作　用的研究．农垦医学，２００８，２６（８）：４０５—４０６．　６　韩春姬，李铁万，李莲姬，等．轮叶党参多糖对小鼠Ｓ１８０肉瘤的　抑制作用．延边大学医学学报，２０００，２３（４）：２４９—２５０．　７　国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）．北京：化学工业　出版社．２００５．　易氧化，配制苯酚前需要对苯酚进行纯化处理，否则　影响测定结果的准确度．但是只要注意苯酚的避光　保存。先取苯酚和水再加硫酸的顺序配制试液摇匀，　测定结果良好，可以进行大量样品的处理。从实验结　８　吴立军．天然药物化学．５版．北京：人民卫生出版社，２００５．　９　王晔，周凯，齐曼丽．灵芝滴丸中灵芝多糖的含量测定．中国药品　标准，２００７，８（１）：４２—４３．　（收稿日期：２０１０—０ｌ一０８）