硫酸阿托品滴眼液的稳定性考察

摘要】目的：考察硫酸阿托品滴眼液的稳定性，预测其有效期。方法：采用HPLC法测定硫酸阿托品滴眼液中硫酸阿托品的含量，以初匀速法预测其稳定性。结果：硫酸阿托品在40.0μg.ml-1-160.0μg.ml-1范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为100.1%，RSD为1.1%。同时硫酸阿托品滴眼液随温度的升高以及存放时间延长其含量将下降，pH也下降明显，测得25℃时其有效期为8-9个月。结论：本品室温下存放即可。

【关键词】初匀速法 硫酸阿托品滴眼液 稳定性

【中图分类号】R96 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）07-0123-02

Study on Stability of Atropine Sulfate eye Drops

【Abstract】objective: To detect stabilization of Atropine Sulfate eye Drops and divine the effective period. Methods：The HPLC was used to detect the content of Atropine Sulfate in Atropine Sulfate eye Drops. Initial average rate method was used in

predicting the expiry term. Results：The dimension of Atropine Sulfate for 40.0μg.ml-1-160.0μg.ml-1，the average recovery rate is 100.1%，RSD is 1.10%. The content of Atropine Sulfate and the alteration of pH were linearly reduced with temperature rising. The expiration of Atropine Sulfate was found to be 8-9 month at 25℃.

Conclusion：Initial average rate is rapid，convenient and precise ，so it is suitable for stability study of hospital preparations.

【Key words】 initial average rate method atropine sulfate eye drops stabilization 硫酸阿托品滴眼液[1]为眼科常用制剂，它是以硫酸阿托品，氯化钠、对羟基苯甲酸乙酯、注射用水等配制而成。本品为抗胆碱药，具有散瞳和麻痹睫状体作用，用于散瞳检查眼底及验光，深层角膜溃疡、角膜炎、虹膜睫状体炎等。疗效确切，临床效果较好。硫酸阿托品含量测定方法文献曾报道的有酸性染料比色法[2]、BaSO4比浊法[3]、系数倍率法[4]、电荷转移络合分光光度法[5]、离子对比法[6]、HPLC法[7]。硫酸阿托品为脂类药物，水溶液易水解失效，水解的速度受温度的变化而变化。该药《中国医院制剂规范》仅要求避光，密封保存，对其稳定性预测其他文献杂志未见有效的报道。本课题对硫酸阿托品滴眼液稳定性进行考察，以HPLC法测定硫酸阿托品滴眼液中硫酸阿托品的含量变化，观察在初匀速法[9][10]下含量及pH等的变化来考察其稳定性的变化，对贮存期进行预测，为临床合理用药提供依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器

Agilent1100高效液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司），Sino Chrom ODS-BP C18柱（5μm，4.6×150mm），BP211D型电子天平（德国赛多利斯公司），电热恒温水浴锅（上海医疗器械七厂）。 1.2 试药

硫酸阿托品对照品（中国药品生物制品检定所，批号为0040-9109），硫酸阿托品滴眼液（本院制剂室自制），甲醇（色谱纯，国药集团化学试剂有限公司110809），磷酸二氢钾（南京化剂厂,110206）,氯化钠(通州市化学制剂厂110917),对羟基苯甲酸乙酯（广东省台州市新华制药厂110326）。 2 方法与结果 2.1 色谱条件

色谱柱为Sino Chrom ODS-BP C18色谱柱（5mm，4.6×150mm）；流动相为甲醇—0.5%磷酸二氢钾（35:65），流速为1.0mL•min-1，检测波长为217nm,进样量为20μL，柱温为室温。 2.2 系统适应性试验

精密称取105℃干燥至恒重的硫酸阿托品对照品100mg（实称102.7mg）置100mL量瓶中加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，取此贮备液5.0mL置50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，在2.1项下色谱条件下进样20μL测定，结果硫酸阿托品与杂质峰分离良好，出峰时间在5分钟左右，理论塔板数达4000以上，色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图 2.3 标准曲线的制备

取2.2项下的贮备液2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL、7.0mL、8.0mL置50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，配成系列标准溶液，按2.1项色谱条件分别进样20μL，测定峰面积，并将峰面积对其浓度进行线性回归，得回归方程为A峰=14.9727C+24.3857（r=0.9999），在40.0μg.ml-1-160.0μg.ml-1范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系。 2.4 精密度测定

取41.08μg•mL-1，102.7μg•mL-1，164.32μg•mL-1低、中、高三种浓度的溶液重复进样5次，测定峰面积，计算日内RSD分别为0.36%、0.12%、0.37%，日间RSD分别为1.67%、1.20%、0.89% 。 2.5 回收率试验

精密称取硫酸阿托品对照品（105℃干燥至恒重）40mg、50mg、60mg各3份分别置

50mL量瓶中，同时按处方比例加入辅料成分配置模拟硫酸阿托品滴眼液，精密量取此滴眼液5mL置50mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，进样20μL，测峰面积，代入回归方程计算含量，并计算回收率。结果见表1 表1 回收率实验结果

Table 1 result of recovery test

2.6 稳定性试验

采用初匀速法，将硫酸阿托品滴眼液成品分别放入40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃的恒温水浴锅中，分别间隔90h、80h、70h、50h、40h、10h取样，立即置冰浴中冷却。精密量取此冷却液1.0mL置25mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，按2.1项下色谱条件进样20μL测峰面积，将峰面积代入回归方程计算含量，以Ct=C0e-kt计算各浓度下的速度常数k，结果见表2，同时测定溶液的pH值。

以Lnk～ EMBED Equation.KSEE3 \\* MERGEFORMAT 进行线性回归，得回归方程为：Lnk= -7882.86！！ EMBED Equation.KSEE3 \\* MERGEFORMAT +15.4886(r= -0.9955)。在室温25℃时，绝对温度T=298K，将T代入回归方程计算得k25℃=1.7315×10-5（h-1），则下降90%所需的时间t0.9=Ln（C0/Ct）/k=6087.21h=8.5个月。该成品在存放过程中其pH会下降。 3 讨论

3.1 方法的选择

初匀速法热稳定性试验不同于经典恒温法的一种热稳定性试验方法，与后者相比具有取样点少，在每个温度段只需测定一次含量，大大减少分析工作者的时间，简便、省时、准确，故适用于医院制剂稳定性研究。其原理如下：将具有含量均一性的样品分别置于不同的温度段恒温加热，定时取样，迅速降温终止反应，测定零时刻初始含量C0及加热后含量Ct，然后进行数据处理。采用初匀速法时，当样品分解较少时，可视反应初始速度为一定值，即记V0=（C0-Ct）/t，将摄氏温度t转换为绝对温度T（T=t+273.0），以lgV0对EMBED

Equation.KSEE3\\* MERGEFORMAT进行线性回归。将室温T值代入回归方程，推算出室温储存期，既得。据此提出初匀速法热稳定性试验估算法。认为Ct=C0e-kt，k=Ln（C0/Ct）/t；将摄氏温度t转换为绝对温度T，以Lnk对EMBED Equation.KSEE3\\* MERGEFORMAT进行线性回归；

将室温T值代入回归方程外推求算出室温常数k25℃及室温储存期t0.925℃，即得。通过对硫酸阿托品滴眼液的稳定性考察，测得有效期为254天（8.5个月），达到了自制滴眼液有效期为6个月的要求。 3.2 流动相的选择

曾报道过HPLC法测定消旋山莨菪凝胶的含量[11]，选用的是甲醇-0.5%磷酸二氢钾

（22:78）作为流动相进行试验，因硫酸阿托品的结构和消旋山莨菪碱相似，仅相差一个羟基，所以我们选用相同的流动相，但出峰时间较长，因此改变了流动相物质之间的配比为35:65，结果表明，各峰分离良好，保留时间适宜，故选用此流动相。

3.3 硫酸阿托品分子中含有酯键，它在弱酸性及近中性条件下较稳定，在碱性溶液中分解（如加热则分解更迅速），生成莨菪酸及莨菪醇而失效。因此硫酸阿托品滴眼液在灭菌及贮备过程中，受到外界因素（如温度等）影响时，其水溶液易水解，使含量和pH下降。 参考文献

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表2 不同浓度下反应速度常数k