医学细胞生物学

维普资讯 http://www.cqvip.com ２ｏ０７　Ｖｂ１．１３，Ｎｏ．１　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ａｂｓｔｒａｃｔｓ（Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｅｄｉｉｔｏｎ）　ｌ４７　面神经干分叉前的主要分支有耳后神　经、二腹肌神经和茎突舌骨肌神经．结　论：以茎突作为标志追踪垒颈乳孔。在　茎乳孔处寻找面神经于的方法安全可　靠，面神经一部分舌下神经吻合是可行　的．图１参１４　关键词；面神经　面神经一舌下神经吻　合术：显微解剖　０７０１０９９５　３１０－１７医学细胞生物学　人脂联素球状结构域（ｇＡｄ）基因的克隆、　融合表达和纯化＝Ｃｌｏｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｆｕｓｉｏｎ　量ＲＮＡ中扩增ｃＤＮＡ用于标记探针，　与基因芯片杂交后分析培养前后以及不　同培养模式下培养的ＣＤ３４　造血干／祖　细胞基因表达的差异，结果：在所检测　的５８８个基因中，４５个基因在培养前后　的ＣＤ３４　造血干／祖细胞中差异表达。　其中２０个基因在培养后表达上调，２５　杨瑁，田文标，朱永红，毛旭虎，邹全　明，／中国生物制品学杂志．一２ＯＯ６，　１９（２）．一１３４～１３８　个基因表达下调．另外，１２个基因在不　同培养模式中差异表达，只有ＣＣＬ２在　动态培养中高表达，而其余１１个基因均　目的：对人白细胞介素一２４（ｈｌＬ一２４）进行　克隆、表达和纯化．方法：分离人外周　血单个核细胞。Ｃｏｎ　Ａ刺激培养。提取　细胞总ＲＮＡ，应用ＲＴ－ＰＣＲ技术从外周　血单个核细胞中扩增ｈｌＬ一２４成熟肽编码　区，定向克隆至融合表达载体ｐＧＥＸ一　４Ｔ－１。重组载体ｐＧＥＸ一４Ｔ－１／ｈｌＬ一２４经　在静态培养中高表达．结论：通过分析　ＤＮＡ测序鉴定后，转化Ｅ　ｃｏｌｉ　ＢＬ２１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｇｌｏｂｕｌａｒ　ｄｏｍａｉｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｏｎ（ｇＡｄ）ｉｎ　Ｅ　ｃｏｌｉ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｉｆ—　ｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｐｒｏｄｕｃｔ旰０，中］／杨　泽华（／ｈ西医科大学生物化学与分子生　物学教研室，太原０３０００１）。解军。杨琦。　张悦红，牛勃，／中国生物制品学杂志．一　２００６，１９（１）．一１７～２０　日的：建立人脂联素球状结构域（ｇＡｄ）　融合组氨酸标签的原核高效表达体系，　并分离纯化ｇＡｄ．方法：从淋巴细胞中　提取人基因组ＤＮＡ，ＰＣＲ扩增出含有脂　联素编码序列的片段，经Ｔ－Ａ克隆入　ｐＭＤ１８一Ｔ载体中。然后设计适当的引　物，引入起始密码、ｃ端连续６个组氨　酸编码序列、终止密码以及相应的酶切　位点，把脂联素球状结构域（ｇＡｄ）基因亚　克隆到表达载体ｐＢＶ２２０，将序列鉴定　正确的重组质粒转化入大肠杆菌ＤＨ５　中，用４２℃温控诱导表达目的：蛋白．结　果：在大肠杆菌中成功实现了ｇＡｄ稳定　高效表达。表达产物以包涵体形式存在，　表达量约占全菌蛋白的１９％，用超声破　菌，经金属离子（Ｎｉ　）配体亲和层析一步　纯化得到了均一蛋白。经聚丙烯酰胺凝　胶电泳鉴定得到了较高纯度的ｇＡｄ．结　论：已成功表达了ｇＡｄ融合蛋白，为进　一步研究其生物学功能和作用机制奠定　了基础．图６参８　关键词：脂联索；球状结构域；融合表　达；纯化　０７０１０９９６　３１０－１７　体外培养环境对脐血ＣＤ３４　造血干／祖　细胞基因表达的影响＝Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｃｕｌ—　ｔｕｒｅ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｏｎ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓ—　ｓｉｏｎ　ｏｆ　ＣＤ３４　ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ　ｓｔｅｍ／ｐｒｏ－　ｇｅｎｉｔｏｒ　ｃｅｌｌｓ　ｆｒｏｍ　ｕｍｂｉｌｉｃａｌ　ｃｏｒｄ　ｂｌｏｏｄ　［刊，中］／李群良（华东理工大学生物反　应器工程国家重点实验室，上海　２００２３７），蔡海波，刘启威，谭文松，，中　国生物制品学杂志．一２０ｏ６，１９（１）．一　７７￣８０　目的：研究体外培养环境对脐血ＣＤ３４　造血于／祖细胞基因表达的影响．方法：　脐血单个核细胞（ＭＮＣ）在静态和动态培　养系统中培养７　ｄ后，收集ＣＤ３４　造血　干／祖细胞，利用ＳＭＡＲＴ－ＰＣＲ技术从少　体外培养环境对ＣＤ３４　造血干／祖细胞　基因表达的影响，可以在分子水平上理　解ＣＤ３４　造血干／祖细胞对培养环境的　生理响应．表２参６　关键词：脐血：ＣＤ３４　造血干／祖细胞；　培养环境；基因表达　０７０１Ｏ９９７　３１０・１７　人ｓＡＢＡＦＦ的高效原核表达及纯化＝　Ｈｉｇｈ　ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｉｆｃａ—　ｔｉｏｎ　ｏｆｈｕｍａｎ　ｓＡＢＡＦＦ［刊，中］／黄刚（第　三军医大学生物化学与分子生物学教研　室，重庆４０００３８）。何风田，李蓉芬，高　会广，陈麟风，龚薇，胡颖，胡大强，／　中国生物制品学杂志．一２０ｏ６，１９（２）．一　１３０～１３３　目的：克隆ＴＮＦ家族Ｂ细胞激活因子（Ｂ　ｃｅｌｌ　ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｏ　ｔｈｅ　ＴＮＦ　ｆａｍｉｌｙ，　ＢＡＦＦ）胞外区１３４～２８５（ｓＢＡＦＦ１３４＿２８５）氨　基酸残基段缺失突变体（ｓＡＢＡＦＦ）的　ｃＤＮＡ；并进行表达及纯化．方法：以构　建的重组质粒ｐＵＣ１９／ｓＢＡＦＦ为模板，　采用一步反向ＰＣＲ法，扩增缺失编码　ｓＢＡＦＦ的１４２～１６０位氨基酸的核苷酸　序列．经测序证实后，克隆入原核表达　载体ｐＱＥ－８０Ｌ．经ＩＰＴＧ诱导表达，　ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测表达产　物，Ｎｉ２＋－ＮＴＡ柱层析纯化目的蛋白．结　果：经一步反向ＰＣＲ扩增后得到４０１　ｂｐ　的ＤＮＡ片段，该片段序列与ＧｅｎＢａｎｋ　报道的编码人ＡＢＡＦＦ的胞外区　（ｓＡＢＡＦＦ）ｃＤＮＡ序列一致．含ｓＡＢＡＦＦ　的表达载体在大肠杆菌中可表达出相对　分子质量为１８　０００的蛋白质并以包涵体　的形式存在，经Ｎｉ２＋．ＮＴＡ柱层析纯化　后得到高纯度的目的蛋白．结论：已成　功地制各出人ｓＡＢＡＦＦ蛋白，为其功能　的研究创造了条件．图５参１Ｏ　关键词：ＴＮＦ家族Ｂ细胞激活因子；　ｃＤＮＡ克隆；原核表达　０７０１０９９８　３１０・１７　人白细胞介素．２４基因的克隆、表达和纯　化＝Ｇｅｎｅ　ｃｌｏｎｉｎｇ，ｆｕｓｉｏｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｎａｄ　ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆｈｕｍａｎ　ｎｉｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２４［刊，　中］／肖斌（第三军医大学医学检验系临　床微生物及免疫学教研室重庆市生物　制药工程技术研究中心，重庆４０００３８），　（ＤＥ３），ＩＰＴＧ诱导表达。阴离子交换层　析纯化融合蛋白，ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ鉴定．结果：所得ｈｌＬ．２４基因经序　列分析，与ＧｅｎＢａｎｋ公布一致．所构建　融合表达载体ｐＧＥＸ一４Ｔ＿１／ｈＩＬ．２４测序　正确，转化ＢＬ２１（ＤＥ３）后，３７℃诱导表　达相对分子质量约为４４　０００的融合蛋　白，主要以包涵体形式存在，占菌体总　蛋白的３０．６３％，经纯化后，纯度达８５％　以上．Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测能与兔抗人ＩＬ一２４　的多克隆抗血清发生结合反应．结论：　已成功构建了ｈｌＬ一２４的融合表达载体　ｐＧＥＸ．４Ｔ－１／ｈｌＬ．２４，并在大肠杆菌中高　效表达，纯化后获得了高纯度的融合蛋　白，为ｈＩＬ一２４的功能及活性研究奠定基　础．图７表１参７　关键词：人ＩＬ一２４：克隆；融合表达：离　子交换层析　０７０１０９９９　３１０・１７　体外培养前后脐血ＣＤ３４　细胞差异表达　基因的筛选＝Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉｌａｌｙ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｇｅｎｅｓ　ｏｆ　ｃｏｒｄ　ｂｌｏｏｄ　ＣＤ３４　ｃｅｌｌｓ　ｂｅｆｏｒｅａｎｄ　ａｆｔｅｒ　ｃｕｌｔｕｒｅｉｎ　ｖｉｔｒｏ旰Ｕ，中］／　刘启威（华东理工大学生物反应器工程　国家重点实验室，上海２００２３７），李群良，　蔡海波，谭文松，／中国生物制品学杂　志．一２ＯＯ６，１９（２）．一１３９～１４２　目的：筛选扩增培养前后脐血ＣＤ３４　细　胞差异表达基因．方法：将新鲜分离的　ＣＤ３４　细胞设为对照组，经静态和动态　培养系统扩增的ＣＤ３４　细胞设为试验　组，应用基因差异显示技术（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）　比较两组之间的基因表达差异，对差异　表达基因片段进行克隆、测序及生物信　息学分析，并且通过半定量ＲＴ－ＰＣＲ方　法：验证基因差异表达的真实性．结果：　应用差异显示技术筛选出５个差异表达　基因，其中４个为已知功能基因，１个　为未知功能基因，对其中２个基因ＲＡＮ　和ＤＣ２４进行半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测表明，　在静态和动态体系扩增培养后的ＣＤ３４　细胞内，ＲＡＮ　ｍＲＮＡ的表达水平分别是　新鲜分离细胞的１．５２１和３．９７８倍，ＤＣ２４　ｍＲＮＡ的表达水平分别是新鲜分离　ＣＤ３４　细胞的１４．２７５和２．３７４倍．结论：　发现了与ＣＤ３４　细胞体外增殖相关的一　维普资讯 http://www.cqvip.com １４８　些重要基因，为从基因水平调控ＣＤ３４　细胞体外增殖提供依据．图４表２参１０　关键词：ＣＤ３４　细胞；差异表达；体外　培养　０７０１１０００　３１０・１７　５一Ｆｕ对人结肠癌细胞凋亡过程中ＤＮＡ　损伤修复基因表达的影响＝Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　５一Ｆｕ　Ｏ１１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆＤＮＡ　ｄａｍａｇｅ—ｒｅ—　ｐａｉｒ　ｇｅｎｅ　ｄｕｎｎｇ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｃｏｌｏｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ［刊，中］／薛立娟（吉林大学　中日联谊医院中心研究室，长春１３００３３），　卜丽莎，杨绍娟，崔亚南，王维忠／／中国　生物制品学杂志．—２００６，１９（２）．一ｌ５９～　１６１　目的：探讨５－Ｆｕ对人结肠癌细胞（ＨＣＴ／８）　凋亡过程中ＤＮＡ损伤修复相关基因表　达的影响．方法：通过形态学、基因组　电泳、吖啶橙染色及流式细胞仪，观察　大肠癌细胞凋亡情况，同时应用基因芯　片分析５　Ｆｕ作用后ＤＮＡ损伤修复相关　基因表达的变化．结果：经流式细胞仪　检测发现，５．Ｆｕ作用于ＨＣＴ／８细胞４８ｈ　与对照组相比，凋亡细胞数明显增加，　基因组电泳出现典型的梯形条带，基因　芯片分析显示，１２个与ＤＮＡ损伤修复　相关的基因中，上调基因３个，下调基　因９个．结论：５一Ｆｕ作用于结肠癌细胞，　导致多种ＤＮＡ损伤修复基因发生改变，　综合作用使细胞不能及时对损伤ＤＮＡ　进行修复，最终导致细胞发生凋亡．图　２表３参７　关键词：５一氟尿嘧啶；结肠癌；细胞凋　亡；基因芯片；ＤＮＡ损伤修复基因　０７０１１０Ｏ１　３１０・１７　紫杉醇诱导细胞凋亡的研究［刊，中］／　陈宇（吉林大学中日联谊医院心血管内　科，长春１３００３１），张明秋，李学军，贺　晓楠，陈晨，杨海山，杨萍，，中国生物制　品学杂志．一２００６，ｌ９（４）．一３７ｌ～３７２　目的：探讨紫杉醇诱导细胞凋亡的效　果．方法：采用末端ＤＮＡ片段原位标　记法检测紫杉醇诱导细胞凋亡作用．结　果：正常ＳＭＣ对照组偶见凋亡细胞，　加入紫杉醇ＳＭＣ，可见大量凋亡细　胞．结论：紫杉醇可诱导人脐动脉ＳＭＣ　的凋亡，其作用随药物剂量的增加而变　强．图２表１参４　关键词：３　末端ＤＮＡ片段；原位标记法；　紫杉醇；细胞凋亡　０７０１１００２　３１０・１７　创伤失血后大鼠单核／巨噬细胞分泌功　能变化的异质性及其意义＝Ｈｅｔｅｒｏ．　ｇｅｎｅｉｔｙ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｍｏｎｏｃｙｔｅ／ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｓｉｇｎｉｉｆ—　ｃａｎｃｅ　ａｆｔｅｒｔｒａｕｍａｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎ　ｒａｔ［刊，　中］／尹华华（第三军医大学大坪医院野　战外科研究所一室，重庆４０００４２），夏浩，　中国学术期刊文摘（中文版）　朱京慈，顾长国，徐发良，李磊，，中国危　重病急救医学．一２ｏ０６，１８（９）．一５２３～　５２６　探讨单核／巨噬细胞分泌功能异质性与　创伤后机体免疫功能紊乱的相互关　系．健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只，按随机数　字表法分为创伤前及创伤失血后１、４　和７　ｄ组．分别以放射免疫法测定不同　部位单核／巨噬细胞分泌白细胞介素一６　（ＩＬ．６）及ＩＬ．１０的含量．结果：①生理状　态下，腹腔巨噬细胞（ＰＭ）ＩＬ一１０分泌量　最高，单核细胞（Ｍｏ）次之；而Ｍｏ的ＩＬ一６　分泌量最高，ＰＭ次之：肺泡巨噬细胞　（ＡＭ）两种细胞因子的分泌量均处于较　低水平．②创伤失血后大鼠单核／巨噬细　胞各部位分泌功能变化具有差异　性．ＡＭ的ＩＬ一６及Ⅱ，ｌ０分泌均显著增　加；ＰＭ的ＩＬ一６分泌伤后１　ｄ和４ｄ下降，　７　ｄ上升，略高于伤前；与之相反，伤后　ｌ　ｄ和４ｄＩＬ一１０分泌显著增高，７　ｄ降低，　略低于伤前．Ｍｏ的ＩＬ一６分泌持续下降，　ＩＬ—ｌ０分泌持续上升，至伤后７　ｄ达顶　峰．结论：生理状态下单核／巨噬细胞分　泌能力存在异质性，创伤失血后这种异　质性表现更为明显，并可能成为创伤后　机体分泌功能紊乱的重要原因．图２表　ｌ参１５　关键词：单核细胞；巨噬细胞；异质性；　分泌能力；白细胞介素类　０７０１１００３　３１０－２１人体生理学　脂滴包被蛋白（ｐ　ｌｊｐ　）调控脂肪分解＝　Ｐｅｒｉｌｉｐｉｎ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｌｉｐｉｄ　ｄｒｏｐｌｅｔｓ　ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｌｉｐｏｌｙｓｉｓ［刊，中］／徐冲（北京大　学医学部生理学与病理生理学系分子心　血管学教育部重点实验室，北京１０００８３），　何金汗，徐国恒，，生理科学进展．一２ｏｏ６，　３７（３）．一２２１～２２４　脂滴包被蛋ｆ￣（ｐｅｒｉｌｉｐｉｎ）包被在脂肪细胞　和甾体生成细胞脂滴表面．基础状态下　ｐｅｒｉｌｉｐｉｎ可减少甘油三酯水解，使其贮　备增加；脂肪分解时磷酸化的ｐｅｒｉｌｉｐｉｎ　能促进甘油三酯水解，而且该蛋白对激　素敏感脂酶从胞浆向脂滴转位是必需　的．据推测，ｐｅｒｉｌｉｐｉｎ可能在脂肪分解　调控中起到“分子开关”的作用．蛋白激　酶Ａ（ＰＫＡ）、细胞外信号调节激酶（ＥＲＫ）　等信号转导通路参与了脂肪分解．肿瘤　坏死因子　（ＴＮＦ　）、过氧化物酶体增　殖物激活受体　（ＰＰＡＲ　）激动剂、瘦素　（１ｅｐｔｉｎ）均可以影响ｐｅｒｉｌｉｐｉｎ的表达．新　近研究表明，ｐｅｒｉｌｉｐｉｎ可通过蛋白酶体　途径来调节其蛋白量的表达．脂肪分解　调控中的关键蛋白ｐｅｒｉｌｉｐｉｎ可以和２型　糖尿病、肥胖、动脉粥样硬化等多种代　谢性疾病及心皿管疾病联系起来．图１　参２０　２００７年１３卷第１期　关键词：脂滴包被蛋白；脂肪分解；脂　滴：脂肪细胞　Ｏ７０１１Ｏ０４　３１０・２１　低氧诱导因子．１及其在缺血性心脏疾病　中的作用＝Ｈｙｐｏｘｉａ　ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ　ｆａｃｔｏｒ－１　ｎａｄ　ｉｔｓ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｃａｒｄｉａｃ　ｄｉｓｅａｓｅ　［刊，中］／刘磊（山西医科大学生理学教　研室，太原０３０００１），赵荣瑞，，生理科学　进展．一２ｏ０６，３７（３）．一２５１￣２５４　低氧诱导因子一１（ＨＩＦ一１）是一种在氧平　衡调节中起重要作用的转录活化因子，　其靶基因编码的蛋白可分为促进氧转运　的蛋白和促进代谢适应的蛋白．ＨＩＦ．１　的表达和激活主要受细胞内氧浓度的调　节及其他一些主要的信号转导途径的调　节．ＨＩＦ．１参与了多种缺血性心脏疾病　的适应性反应，对ＨＩＦ．１的深入研究可　能为缺血性心脏疾病提供新的有效治疗　途径．表１参９　关键词：低氧诱导因子一１；低氧；信号　转导；缺血性心脏疾病　０７０１１００５　３１０・２１　ＡＧｓ３蛋白与Ｇ蛋白信号转导＝ＡＧＳ３　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ａｎｄ　ｈｅｔｅｒｏｔｒｉｍｅｒｉｃ　ＧＴＰ－ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｓｉｇｎａｌ　ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ［刊，中］／邸　瑶（武警医学院生理学教研室，天津　３００１６２），夏时海，佟长青／／生理科学进　展．一２ｏｏ６，３７（３）．－２６３￣２６５　ＡＧＳ３蛋白是影响受体到Ｇ蛋白的信号　转导或直接影响非受体依赖型Ｇ蛋白激　活的蛋白质之一．ＡＧＳ３蛋白在脑、睾　丸、肝脏、肾脏、心脏、胰腺及ＰＣ一１２　细胞中普遍分布．它不仅具有不依赖受　体的ＧＳｒ信号转导激活物的作用，也能　作为二磷酸鸟苷（ＧＤＰ）的解离抑制剂，　并负向调节Ｇ蛋白偶联受体对Ｇ蛋白的　激活．ＡＧＳ１、ＡＧｓ２、ＡＧｓ４是ＡＧＳ家　族的其它几个成员，能选择性激活不同　类型的Ｇ蛋白．ＬＯＮ和ＰＩＮＳ蛋白是　ＡＧＳ３的同系物．ＡＧＳ３蛋白与信号转导　的关系是目前研究的热点之一．参１Ｏ　关键词；Ｇ蛋白；信号转导；ＡＧＳ蛋白　０７０１１００６　３１０・２１　Ｃａｖｅｏｌｉｎ．３与高血压性心肌肥大＝　Ｃａｖｅｏｌｉｎ一３　ａｎｄ　ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ　ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ　ｃａｕｓｅｄｂｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ［刊，中］／许研（广　东医学院生理学教研室，湛江５２４０２３），　李岷雯，王庭槐，，生理科学进展．—２０ｏ６，　３７（３）．—＿２６９～２７２　Ｃａｖｅｏｌａｅ是富含胆固醇、鞘磷脂和鞘糖　脂的胞膜内陷结构，在信号转导过程中　起到“信使中心”的作用．Ｃａｖｅｏｌｉｎ．３是整　合在Ｃａｖｅｏｌａｅ上的肌细胞特异性蛋白，　其异常可能与一些心血管疾病、肌营养　不良症等有密切的关系，对Ｃａｖｅｏｌｉｎ．３　的调控也是维持心脏正常功能及内环境　稳定的必要因素．目前研究已将注意力